Når det skjer en reaksjon mellom to stoffer eller flere, vil det dannes ulike produkter i løpet av ulik tid. Reaksjonene vil reagere trinnvis, som kalles et reaksjonsforløp. Ved manuell utførsel er dette vanligvis inkuberingstiden, den tiden man venter på at reagensene skal komme til en likevektsfase. I en kjemisk reaksjon vil det skje en prosess hvor ett eller flere stoffer vil reagere og danne en eller flere nye forbindelser. De stoffene som reagerer kalles reaktanter, og stoffene som dannes kalles produkter.
Eks. på en slik reaksjon kan være når hydrogengass(H2) reagerer med oksygen(O2) og danner vann (H2O) i væskeform.
Reaksjonslikningen vil da være:
2H2 (g) + O2 (g) → 2H2O (l)
Reaksjonsforløpet framstilles i kurver som uttrykker hva skjer før blandingen når likevekt. Ofte framstilles reaksjonsforløpet for å kunne oppdage endringer i for eksempel absorbans, substratkonsentrasjon, enzymaktivitet, pH og temperatur over tid.
Enzymkatalysert konsentrasjonsmåling er et eksempel på en reaksjon som skjer i et reaksjonsforløp, her framstillt ved en reaksjonskurve (Figur 1). Måling av reaksjonsforløpet utføres ikke manuelt, men instrumentelt ved bruk av for eksempel Pentra ABX 400. Dette er fordi instrumenter som Pentra er i stand til å utføre regelmessig målinger av for eksempel absorbans ved konstant tidsintervaller.
Ved reaksjonen vist i figur 1 tilsettes enzymkatalysator for å påskynde en reaksjon, uten at enzymet vil bli forbrukt eller endret. Når alle de aktive setene i enzymene er "tatt opp" og/eller substrater har blitt omdannet til produkt, vil kurven flates ut. Det vil altså etter en viss tid bli lite enzymer og/eller substrat igjen til omdanning til produkt, og dermed vil reaksjonen skje saktere og tilslutt opphøre. Reaksjonen er ved likevekt når alt enzym er tatt opp og/eller alt substrat er blitt omdannet.
Fram til "knekken" i figuren blir prøven blandet med reagenser. Fra knekken går det en tilnærmet lineær linje, her er det er mange substrater og enzymer ledige og reaksjonen går fort. Dette området kalles 0.ordensfasen. Det blir etterhvert mindre av ledige enzymer og/eller substrater i prøven og kurven vil begynne å krumme. Dette området kalles for 1.ordensfase. Etter krummen flates kurven ut og likevektsfasen kommer når alt enzymet er tatt opp og/eller alt substrat er blitt omdannet. Dette området kalles for likevektsfasen.
Figur 1: Reaksjonsforløp ved absorbansmåling av prøver som er enzymkatalysert for konsentrasjonsmåling.
Referanser:
- http://medtekipedia.wikispaces.com/Enzymkatalysert+Konsentrasjonsm%C3%A5ling- 28.09.2012.
- C.A.Burtis, E.R.Ashwood, D.e. Bruns, Tietz, Fundamentals of clinical chemistry, sixth ed., Saunders Elsevier, s. 144-146