Endepunktsmetode (Equilibrium Methods) er en analysemetode som blir brukt til å enzymatisk bestemme mengden av et stoff. Denne endepunktsmetoden blir også kalt likevektsmetode siden reaksjonen slutter ved likevekt. Det vil si når alle substratene har blitt omgjort til et målbart produkt.
Ved slutten av reaksjonen synker substratkonsentrsjonen til et lavere nivå og enzymkinetikken også kalt Km-verdien er viktig i bestemmelsen av reaksjonshastigheten. For likevektsanalyser er det enzymer med høy affinitet for deres substarter, altså de med lav Km-verdi som er mest passende for slike analyser. Under selve reaksjonsforløpet er likevektsmetoden svært lite følsom ovenfor små forandringer.
Det er ikke nødvendig med eksakt samme mengde enzym i hver reaksjonsblanding, eller ha konstant pH eller temperatur. Dette er forutsatt at variasjonene ikke er så store at reaksjonen ikke går fullstendig innenfor et bestemt tidsrom. [1]
Ved endepunktsmetoden benyttes to absorbansavlesninger, første og siste avlesningspunkt, for å bestemme reaksjonshastigheten.
ΔAbs = Abssist –Absførst[2]
Kilder:
[1] "Tietz,Fundamentals of clinical chemistry" av Carl A. Burtis, Edward R. Ashwood og David E. Bruns, 6.utgave, side 153, "Equilibrium Methods".
[2] "ABX Pentra 400 - Brukermanual", side 8-30/31, "Beregningsprinsipper"