Oppløsning, Rs
Kromatografisk separasjon bygger på prinsippet av at ulike komponenter i en prøve har ulik retensjonstid gjennom en mobil og en stasjonær fase.(1)
Oppløsning (Rs) sier noe om hvor godt de ulike komponentene er separert. I et kromatogram vises dette som avstanden mellom to nærliggende topper.(2)


der:
tR2: retensjonstiden for komponent B
tR1: retensjonsvolumet for komponent A
(tR2 > tR1)
W1: bredden målt ved basen for komponent A
W2: bredden målt ved basen for komponent B

Når Rs er stor, betyr dette at avstanden mellom toppene er stor, og oppløsningen er god. Når Rs er nær null, er toppene overlappende og oppløsningen er dårlig. (3)
Rs kan økes i væskekromatografi ved å endre mobil fase. I gasskromatografi kan R økes ved å endre temperaturen. (3)

Figuren under viser separasjon av to stoffer ved varierende oppløsningsevne og topphøyde(3):

Separasjonen forbedres nedover, når Rs øker.

Figuren under viser effekten av selektivitet og effektivitet på kromatografisk oppløsning.(4):


A viser dårlig oppløsning, B viser god oppløsning på grunn av en effektiv kolonne og C viser god oppløsning på grunn av kolonnens selektivitet.


Referanser:
(1) Burtis, C. A.; Ashwood, E. R.; Bruns, D. E., & Sawyer, B. G., Tietz - Fundamentals of clinical chemistry. Saunders, 2008, 6. utg. (s.112).
(2) Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. & Crouch, S. R., Fundamentals of Analytical Chemistry, 8. utg. 2004, Brooks/Cole, Cengage Learning (s.936).
(3) Holt, R. U.; Forelesning i Medisinsk laboratorieteknologi 2, Kromatografi, 29.09.11.
(4) Burtis, C. A.; Ashwood, E. R.; Bruns, D. E., & Sawyer, B. G., Tietz - Fundamentals of clinical chemistry. Saunders, 2008, 6. utg. (s.116, Figur 7-8).

  • No labels