Et fluorometer er en enhet, et apparat, som benyttes til å måle parametre av fluorescens. Det innebærer at man måler intensitet og bølgelengdespredning av emisjonsspektrum etter eksitering av et visst spektrum av lys. Disse parameterne brukes til å identifisere mengden av de spesifikke molekylene det er i et medium(en prøve). Det finnes ulike typer fluorescens instrumenter, men alle har de mest grunnleggende enhetene. De har felles optisk diagram, hvor vi finner en lyskilde, linse, eksitasjonfilter, emisjonsfilter, kyvetteholder og detektor.
Dersom begge enhetene i bølgelengdespekteret er filter, er det et fluorometerinstrument. Dersom begge enhetene i bølgelengdespekteret er monokromatorer, er det et spektrofluorometerinstrument.
Spektrofluorometer bestråler prøve med eksitasjonslys og måler fluorosens-emittert lys fra prøven for å utføre en kvalitativ eller kvantitativ analyse. En skjematisk spektrofluorometer er beskrevet nedenfor (i dette tilfelle brukt 5301RFPC):
(1) 150W Xenon lampe (2) Eksitasjonsmonokromator (3) Kyvetteholder
(4) Emisjonsmonokromator (5) Emisjonslys detektor
Eksitasjonsmonokromatoren (2) skiller ut lys med spesiell bølgelengde fra xenon lampe (1). Jo sterk eksitasjonslys, desto høyere sensitivitet på spektrofluorometeret. Kyvetteholderen (3) holder kyvetten fylt med prøveløsningen. Emisjon monokromator (4) mottar valgt fluorescens emittert lys fra prøven og sender videre til detektoren (5) for å måle fluorescenslysets intensitet.
Detektoren (5) er for overvåking eller registrering av lys som er bølgelengdeområde som kan være fotocelle, termoelement, bolometer eller fotografisk film. Det brukes xenon lampe på et spektrofluorometer fordi xenonlys har spesielle bølgelengder som har riktig energi til å påvirke eksitasjonsbølgelengden. Eksitasjonsbølgelengden er sammensatt av flere tette linjer slik at en får bølgelengdeområde som gir fluorescens.
Referanser:
Instruction Manual of RF-5310 PC-Shimadzu Corporation
SWHC (Fundamental of analytical chemistry 8th edition) side 830