ALP står for alkalisk fosfatase, og er et hydrolytisk enzym som katalyserer en stor andel av naturlige og syntetiske substrater. 4-nitrofenyl fosfat er det mest anvendte substratet for å bestemme ALP aktiviteten. p-nitrofenyl fosfat er det gamle navnet til substratet.
ALP katalyserer hydrolyse av 4-nitrofenyl fosfat ved pH 10,4, og får et fargeomslag fra blank til gul.[1] Dette vist ved denne likningen:
Figur 1, reaksjon for ALP 4-nitrofenylfosfat [2]
Ved bruk av et spektrofotometer måles enzymets aktivitet ved å se på dannelse av 4-nitrofenol ved en bølgelengde på 405 nm. Mengden 4-nitrofenol målt fotometrisk i prøven vil da være proporsjonal med den katalyserte konsentrasjonen av ALP tilstede i prøven.[3]
Til denne analysen brukes heparinplasma eller serum. Serum som nettopp er tatt bør helst stå i romtemperatur, og analyseres innen 4 timer.[4]
Preanalytiske faktorer som vil være avgjørende for resultat i analysen:
- Valg av prøveglass
- Kompleksdannere som EDTA, citrat vil binde kationer som Mg2+ og Zn2+ som er viktig for måling av ALP. Dette vil føre til feil resultat.
- Ved frysing
- Prøven bør tines 18-24 timer før analysering. Dette for å unngå feil resultat.[5]
Tabell 1, Referanseområder[6]
| Referanseområde for ALP i serum: | Område (U/l) |
| Barn (4-15 år) | 54 - 369 |
| Menn (20-50 år) | 53 - 128 |
| (>60 år) | 56 – 119 |
| Kvinner (20 – 50 år) | 42 – 98 |
| (>60 år) | 53 - 141 |
Kilder:
- Tietz fundamentals of clinical chemistry – Carl A. Burtis, Edward R. Ashwood, David E. Bruns. Sixth edition. Saynders (W.B) Co Ltd 2007. ISBN: 9780721638652.
- http://www.atlas-site.co.uk/index_files/website/$8.05.03.1.0060%20Alkaline%20Posphatase%204x15ml%20S06.pdf
- http://sv.rilpedia.org/wiki/Enzymkopplad_immunadsorberande_analys
[1] Tietz s. 326
[2] http://sv.rilpedia.org/wiki/Enzymkopplad_immunadsorberande_analys (25.09.2011 kl. 1221)
[3] http://www.atlas-site.co.uk/index_files/website/$8.05.03.1.0060%20Alkaline%20Posphatase%204x15ml%20S06.pdf(25.09.2011 kl. 1226)
[4] Tietz s. 326
[5] Tietz s. 326
[6] Tietz s. 327, tabell 19-4