...
Enzym + Substrat ↔ Enzymsubstrat ↔ Produkt + Enzym
E + S ↔ ES ↔ P + E
Hvor fort denne reaksjonen går, er avhengig av pH, temperatur, substrat- og enzymkonsentrajon, inhibitorer, aktivatorer, koenzymer og prostetiske grupper. Dersom alle andre faktorer enn substratkonsentrasjonen er konstante, vil sammenhengen mellom substratkonsentrasjon og reaksjonshastighet være gitt ut i fra Michaelis-Menten kurven:
Figur 1: Michaelis-Menten kurven illustrerer sammenhengen mellom reaksjonshastigheten (Δabs/min) og substratkonsentrasjonen.
Når det er tilsatt så mye substrat at enzymet er mettet, vil reaksjonen nå en makshastighet som vi kaller Vmax og da er kurven i 0. ordens kinetikk. Ved 0. ordens kinetikk vil ikke økning av substratkonsentrasjon ha noen innvirkning på reaksjonshastigheten fordi alle enzymene er i kompleks med substratet og det er ingen ledige plasser for flere substratbindinger. Hvis det derimot tilsettes mer enzym vil reaksjonshastigheten øke.
Enzymaktivitetsmålinger foregår alltid ved 0. ordens kinetikk. Reaksjonshastigheten i en enzymkatalysert reaksjon er direkte proporsjonal med mengden aktive enzymer. Det betyr at man kan måle mengden enzym i en prøve ved å måle reaksjonshastigheten. Reaksjonshastigheten kan måles ved å måle økende konsentrasjon av produkt (evt. avtagende konsentrasjon av substrat). Konsentrasjonen måles med absorbans, og enheten for reaksjonshastighet blir absorbansendring over tid (Δabs/min).
...