Kan apolipoprotein-nivåer målt fra opptinte blodprøver etter 12-14 års nedfrysing brukes for epidemiologiske formål? En pilotanalyse av HUNT 2-data

Abstract

I Norge er det lagret store mengder nedfrosne blodprøver fra helseundersøkelser av ulike slag. Stabilitet av målinger av apolipoproteiner fra langtids nedfrosne blodprøver er lite dokumentert. Ny forståelse av lipoproteinenes fysiologi og betydning for utvikling av ateromatose reiser spørsmålet om andre lipoproteinkomponenter enn total (TC), LDL (LDL-C) og HDL-kolesterol (HDL-C) bør vurderes som risikomarkører. Ikke minst gjelder dette apolipoproteinene og balansen mellom apolipoprotein B (apoB) og apolipoprotein A-1 (apoA-1). Nedfrosne blodprøver kunne kanskje anvendes til å analysere sammenheng mellom nivåer på apolipoproteiner og utvikling av kardiovaskulære hendelser, hvis det ikke har skjedd vesentlige konsentrasjonsforandringer under lagring. For å undersøke dette ble det foretatt en pilotstudie av blodprøver fra 300 personer i HUNT 2. For disse hadde en ferske blodprøver, og i 2009 opptinte blodprøvemålinger av lipoproteiner samt apoB og apo A-1. Disse har bare vært lagret ved –40 ºC. Resultatene viste at TC var øket med 0,3 mmol/L fra fersk til smeltet tilstand til tross for at HDL-C var blitt redusert med 0,25 mmol/L. Korrelasjonene mellom ferske og opptinte prøver var høye (0,93-0,99). Variasjonskoeffisientene var derimot høye (5,8-13,7%) og endringene var nivåavhengige. Nivåene på apolipoproteinene var klart høyere, mens apoB/apoA-1 ratio samsvarte mer med andre studierapporter. Korrelasjonene mellom apo-og lipoproteiner var på et nivå man gjenfinner i andre studier. Resultatene må tolkes som bare indikative på at apolipoproteiner, og da spesielt ratio apoB/apoA-1, kan brukes i HUNT 2 til prognostiske studier av kardiovaskulære hendelser og død. Hoveddelen av HUNT 2 biobank har imidlertid ligget i ro i –80 ºC og lipoproteiner endres neppe ved denne temperatur. Prognostiske studier med apolipoproteiner som prediktorer burde derfor med rimelig sikkerhet kunne utføres i HUNT 2. Endelig bevis for dette kan imidlertid først oppnås når slike opptinte prøver blir analysert.

Can frozen and thawed blood samples stored for 12-14 years be used to measure levels of apolipoproteins? Analysis from HUNT 2 data.           
English Summary: In Norway, large numbers of frozen blood samples from health surveys are stored in freezers at –70 to –80 ºC. An assumption has been that levels of lipoproteins (total cholesterol (TC), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and triglycerides (TG)) have been kept at constant levels during long-term storage. The stability of long-term storage of apolipoproteins is weakly documented. The Health Survey of Nord-Trøndelag in 1995-97 (HUNT 2) provides the possibility to analyse relationships between levels of lipoproteins and incident cardiovascular disease. A project group consisting of the present authors questioned whether use of apolipoproteins as risk markers may give at least as good predictive value as the traditional lipoproteins and whether the frozen samples in HUNT 2 can be used for this purpose. To investigate this issue a pilot study based on 300 thawed blood samples from HUNT 2 was performed. For these subjects lipoprotein levels measured at screening in 1995-97 were available as well as the same levels from the thawed samples including also apolipoprotein B (apoB) and apolipoprotein A-1 (apoA-1). For special reasons these samples had only been frozen down to –40 ºC.